产品描述: T4 RNA Ligase 2，也称为 T4 Rnl 2，具有分子间和分子内 RNA 连接活性。T4 RNA Ligase 2 连接双链 RNA 缺口的活性比连接单链 RNA 缺口的活性更高。该酶可连接相邻的 5'-磷酸和 3'-羟基。在双链结构中，该酶还可以连接 RNA 的 3'-羟基和 DNA 的 5'–磷酸。
规格: 10U/μL
活性单位定义: 一个单位定义为：在 20μL 反应体系中，37°C 孵育 30 分钟，将 0.8μg 等摩尔比的 28-mer 和 18-mer RNA 进行连接，连接 50% 所用的酶量。
酶存储缓冲液: 10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 35mM (NH4)2SO4, 0.1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50%(v/v) Glycerol, pH7.5@25℃.
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T4 RNA ligase 1，T4 RNA ligase 2，RNaseR 在环状 RNA 酶法合成上的应用：
IVT 反应得到线性 RNA：值得注意的是，此步 IVT 反应，需要掺入一定比例的 GMP，获得含 GMP 的线性 RNA；
RNA 环化：通过 T4 RNA 连接酶 1（T4 Rnl 1）或 T4 RNA 连接酶 2（T4 Rnl 2）催化 RNA 末端 5'-磷酸和 3'-羟基的连接，将 RNA 分子内两端连接产生环状 RNA；
去除线性 RNA：RNaseR 能够去除反应液中的所有线性 RNA 分子，从而得到无线性 RNA 的环状 RNA。
注意：T4 RNA ligase 2 的反应体系中需要加入 ATP，可使用 ATP，100mM Solution，Cat#R1331。
储藏条件: Stored at -20±5℃. Do not store in a frost-free freezer. Always avoid freeze-thaw cycles or exposure to frequent temperaturechanges. These fluctuations can greatly alter product stability.
质控检测:
1. Contaminant Assay: Free of Endonuclease, Exonuclease and RNase activities.
2. Endotoxin Assay: Pass.
3. Physical Purity: >95% by SDS-PAGE with Coomassie® blue staining.